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Coltivazione di embrioni - coltivazione "in vitro"

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La coltivazione degli embrioni è una fase importante nella procedura di fecondazione in vitro. Il successivo impianto dell'embrione dipende da quanto successo con successo. Le tecnologie di coltivazione vengono costantemente migliorate, con un'attenzione particolare per i terreni nutrienti. Le droghe moderne sono così vicine nella composizione alle condizioni naturali del corpo della madre.

Cos'è la cultura dell'embrione?

La coltivazione degli embrioni è chiamata processo per creare le condizioni per la fecondazione dell'uovo e il suo ulteriore sviluppo. Tutte le fasi avvengono in laboratorio: in un ambiente speciale, che ha una composizione quasi uguale a quella del liquido nell'utero e nelle tube di Falloppio.

L'inizio della coltivazione dell'embrione avviene un giorno dopo l'estrazione dei follicoli dal corpo della donna. L'embriologo valuta l'inseminazione dell'inseminazione e stabilisce una data stimata per il trasferimento del materiale nell'utero.

Più copie si sviluppano normalmente, più lungo è il tempo della loro coltivazione. Nel processo di sviluppo, uno specialista può determinare quali di essi sono i più fattibili. La selezione consente di aumentare le possibilità di successo dell'impianto. Maggiori informazioni sull'impianto di embrioni con IVF →

La coltivazione di embrioni a lungo termine è uno degli ultimi sviluppi in questo campo della scienza. L'essenza di questa procedura è che la coltivazione continua per 5 giorni prima dello stadio di blastocisti con un'alta capacità di essere attaccata al muro dell'utero. L'opportunità di raggiungere questo livello di sviluppo è emersa attraverso lo sviluppo di sostanze speciali che imitano il microambiente del corpo femminile.

I nutrienti per la coltivazione di embrioni sono in via di sviluppo dal 1912. All'inizio erano una soluzione salina fisiologica. Per oltre un secolo la composizione di queste sostanze è stata migliorata. Nel 1985, mantenerli albumina - una fonte di aminoacidi - è diventato un importante passo avanti e ha permesso di crescere embrioni fino a 2-3 giorni.

Questo ambiente si chiama Human Tubal Fluid. Ulteriori studi hanno dimostrato che lo sviluppo di un ovulo fecondato non si verifica nella stessa sostanza, ma in diverse sostanze. Ciò ha portato alla creazione di media in due passaggi, che sono attualmente utilizzati.

L'ultimo sviluppo che migliora la qualità della procedura è la coltivazione di embrioni nell'ambiente Embryogen. Esso contiene GM-CSF - granulociti fattore stimolante le colonie di macrofagi, che è presente in elevate concentrazioni in utero prima e durante l'attacco dell'embrione alla parete, così come durante la gravidanza Sway.Nelle donne con infertilità, è praticamente assente.

Ambiente EmbryoGen migliora la qualità e la vitalità del materiale tollerante con IVF, aumenta la probabilità di successo dell'impianto e del successivo sviluppo fetale. È indispensabile per i pazienti che hanno già avuto tentativi infruttuosi di inseminazione artificiale, e in quei casi in cui è possibile prendere solo una o due uova.

stadi

La coltivazione degli embrioni inizia il giorno dopo la puntura con l'ovodeposizione fetale e la fecondazione. La coltivazione si svolge in più fasi:

  1. Fase dell'uovo maturo - 1 ° giorno. L'embriologo valuta il successo della fecondazione, separa il materiale di scarsa qualità. Questo stadio di pronuclei. Il trasferimento non è praticamente praticato, ma è possibile cricket le cellule.
  2. Fase di un uovo fecondato con due pronuclei - giorno 2. A questo punto, si forma uno zigote (la fusione dei genomi maschili e femminili), la prima frammentazione avviene. L'uovo diventa un embrione. La sua qualità è valutata in base al grado di frammentazione, forma e dimensioni dei blastomeri.
  3. Embrione in stadio 4 cellule - Giorno 3. Molto spesso, a quest'ora, l'embrione è 6 o 8 blastomeri.C'è un'attivazione del proprio genoma, dal grado in cui con successo e nel tempo determina gli ulteriori stadi della coltivazione. Quando ci sono errori nell'insieme di cromosomi, lo sviluppo si arresta (il "blocco di sviluppo in vitro").
  4. Stadio dell'embrione a 8 cellule - il 4 ° giorno. L'inizio della fase di morula: gli spazi tra le cellule diventano più densi, la superficie diventa più liscia. L'embrione in questo momento consiste di 10-16 blastocisti. Entro la fine del quarto giorno, una cavità appare nella morula - l'inizio della cavitazione.
  5. Il palcoscenico di una morula compatta - il quinto e il sesto giorno. Il volume della cavità occupa metà dell'intera morula - l'embrione diventa blastocisti. Consiste in una massa cellulare interna e un trofoblasto, che fornisce l'impianto.

Vantaggi e svantaggi di ogni fase della coltivazione

In ogni 24 ore di coltivazione ci sono momenti positivi e negativi per il trasferimento dell'embrione nel corpo della donna:

  • 1 giorno. I vantaggi di un periodo così breve sono che il potenziale effetto negativo delle condizioni di coltivazione è minimo. I problemi di trasferimento all'utero sono dovuti al fatto che fisiologicamente in questo momento l'embrione dovrebbe essere nella tuba di Falloppio (non nell'utero).Inoltre, è difficile valutare la sua qualità.
  • 2 giorni. Pro è che l'embrione non è da tempo fuori dell'ambiente naturale e possiamo fare una selezione primaria di copie di alta qualità, dal momento che ha iniziato frantumazione. Contro: Ancora non c'è modo di separare gli embrioni con i disturbi genetici non possono essere fatte diagnosi genetica preimpianto.
  • 3 giorni. La cosa positiva è che puoi separare gli embrioni rimasti indietro nello sviluppo o addirittura fermarli. Gli svantaggi sono gli stessi del secondo giorno.
  • 4 giorni. momento positivo in quel periodo che l'embrione ha raggiunto la fase in cui si trova dal tubo di Falloppio suo movimento nell'utero, cioè la sua introduzione nella cavità per essere vicino alla fisiologica. Come un lungo embrioni in coltura "in vitro" contribuisce al superamento "del blocco" - "in una provetta (vetro)" schiacciamento arresto A questo punto, la diagnosi genetica preimpianto (PGD) può già essere eseguita. Svantaggio: è difficile valutare la qualità dei moruli.
  • 5 giorni. In questo periodo di 2 volte maggiore rischio di blastocisti impiantazione in confronto con embrioni due o tre giorni. C'era una selezione degli esemplari più potenti e di alta qualità, hanno vissuto "blocco di sviluppo" "in vitro", PGD può essere eseguita per valutare la qualità della blastocisti.Il rovescio della medaglia è che se tutti gli embrioni si fermassero nelle fasi iniziali, i pazienti subiscono molto stress, perdono l'opportunità di rimanere incinta.

Effetti collaterali

Quando si esegue la procedura di fecondazione in vitro, non tutte le uova diventano embrioni. Secondo le statistiche, questo indice raggiunge in media il 60-70% con fertilizzazione standard e l'80-90% con l'iniezione intracitoplasmatica dello spermatozoo nell'uovo.

Fino al 40% degli embrioni si sviluppa prima dello stadio di blastocisti, pronto per il trapianto nell'utero. E questi sono indicatori medi, in pratica ci sono casi con una minore probabilità di successo.

La coltivazione degli embrioni "in vitro" avviene con una costante valutazione della qualità dei campioni da parte dell'embriologo. Per molto tempo l'ambiente per lo sviluppo ha permesso di far crescere un uovo fecondato non più di 3 giorni. Potresti ottenere più materiale, ma non è stato possibile valutare con precisione la loro redditività.

Con l'avvento del mezzo in due fasi, la coltivazione prolungata è diventata disponibile, fino a 5-6 giorni. È diventato più facile identificare i campioni di qualità, ma il loro numero è diminuito. C'era il rischio che entro 4-5 giorni non ci fossero più embrioni.È impossibile stabilire cosa abbia determinato esattamente una fermata nel loro sviluppo: condizioni di coltivazione artificiale non ideali o disordini genetici.

La coltivazione degli embrioni è chiamata il processo di monitoraggio del loro sviluppo, selezionando i campioni più vitali e determinando il giorno più favorevole per il loro trasferimento nella cavità uterina. Grazie allo sviluppo di supporti in crescita, questa procedura può durare fino a 4-6 giorni. Entro la fine di questo periodo, il successo dell'innesto dell'embrione è molto probabile nella maggior parte dei casi clinici.

Autore: Olga Khanova, dottore,
soprattutto per Mama66.com

Video utile: coltivazione di embrioni

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